فهرست اشکال

فهرست جداول

ليست علائم و اختصارات

چکيده فارسی

چکیده انگلیسی

فصل اول( معرفی پژوهش)

1-1- بیان مساله

1-2- اهداف تحقیق

1-3- فرضيات تحقيق

فصل دوم( دانستنیهای پژوهش)

2-1- ناباروری

2-1-1- ناباروری اولیه

2-1-2- ناباروری ثانویه

2-2- علل شایع ناباروری در مردان

2-3- تقسیم بندی کلینیکال وژنتیکی مردان نابارور

2-4- اسپرماتوژنز

2-5- میتوکندری انسان

1-5-1- ساختار میتوکندری انسان

2-5-2- عملکرد میتوکندری

2-5-3- زنجیره انتقال الکترون در میتوکندری

2-5-4- ژنتیک میتوکندری و همانند سازی و رونویسی ژنوم آن

2-5-5- اختلالات و جهشهای ژنوم میتوکندری

2-6- نقش عملکردی میتوکندری در تحرک اسپرم

2-6-2 – حذف ها و جهش های نقطه ای  ژنوم میتوکندری وارتباط آن با تحرک اسپرم

فصل سوم (مواد و روشها)

3-1- فهرست وسایل و مواد مورد نیاز

3-1-1- تجهیزات و دستگاهها

3-1-2- مواد مورد استفاده

3-2- جمع آوری و ویژگیهای نمونه های سمن

3-3- آنالیز میکروسکوپی پارامترهای اسپرمی

3-4- استخراج DNA از اسپرم

3-5- تعیین كیفیت و کمیت DNA استخراج شده

3-5-1- روش اسپکتروفتومتری

3-6- طراحی پرایمرهای اختصاصی برایmtDNA

3-7- واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR)

3-7-1- مواد لازم جهت انجام  PCR

3-7-2- برنامه PCR اختصاصی

3-7-3- برنامه Long PCR

3-7-4- روش Primer shift PCR برای تائید قطعات حذف شده

3-8- روش PCR-RFLP جهت تعیین ژنوتیپ جهشهایA3243G  و A73G

3-9- بارگیری نمونه ها روی ژل الكتروفورز آگارز

3-9-1- تهیه محلول  TAE 10X

3-9-2- طرز تهیه ژل آگارز 1%

3-9-3- الکتروفورز ژل آگارز افقی

3-9-4- لودینگ بافر

3-9-5- مارکرهای اندازه DNA

3-10- تعیین توالی DNA DNA sequencing))

3-11- آنالیز آماری داده ها

فصل چهارم(نتايج پژوهش)

4-1- بررسی جمعیت مراجعه کننده گان و انتخاب نمونه ها

4-2- کیفیت و کمیت DNA استخراج شده از اسپرم

4-3- اختصاصی ژنوم میتوکندریایی  PCRآنالیز

4-3-1- تایید حضورmtDNA  در ژنوم استخراج شده

4-3-2- مطالعه حذف های بزرگ در mtDNA

4-3-3-تائید قطعات حذفی با استفاده از  Primer Shift PCR

4-3-4- توزیع فراوانی حذف های ژنوم میتوکندری در افراد بارور و نابارور

4-3-5- آنالیز جهش های A73G و A3243G در افراد بارور و نابارور

4-3-6- تعیین توالی DNA

فصل پنجم( بحث ونتیجه گیری)

بحث

پيوست ها

پيوست 1-: نمونه فرم پرشسنامه مر بوط به مراجعه کنندگان

منابع