بررسی ارتباط حذف ها و جهش های نقطه ای ژنوم میتوکندری با اختلالات اسپرمی مردان نابارور

بررسی ارتباط حذف ها و جهش های نقطه ای ژنوم میتوکندری با اختلالات اسپرمی مردان نابارور تعداد صفحات : 94 صفحه فهرست مطالب فهرست اشکال فهرست جداول ليست علائم و اختصارات چکيده فارسی چکیده انگلیسی فصل اول( معرفی پژوهش) 1-1- بیان مساله 1-2- اهداف تحقیق 1-3- فرضيات تحقيق فصل دوم( دانستنیهای

کد فایل:17936
دسته بندی: علوم پزشکی » پزشکی
نوع فایل:مقالات و پایان نامه ها

تعداد مشاهده: 7 مشاهده

فرمت فایل دانلودی:.docx

فرمت فایل اصلی: docx

تعداد صفحات: 90

حجم فایل:8,688 کیلوبایت

  پرداخت و دانلود  قیمت: 15,000 تومان
پس از پرداخت، لینک دانلود فایل برای شما نشان داده می شود.
0 0 گزارش
  • بررسی ارتباط حذف ها و جهش های نقطه ای ژنوم میتوکندری با اختلالات اسپرمی مردان نابارور

    تعداد صفحات : 94 صفحه

     

    فهرست مطالب

     

     

    فهرست اشکال

     

    فهرست جداول

     

    ليست علائم و اختصارات

     

    چکيده فارسی

     

    چکیده انگلیسی

     

    فصل اول( معرفی پژوهش)

     

    1-1- بیان مساله

     

    1-2- اهداف تحقیق

     

    1-3- فرضيات تحقيق

     

    فصل دوم( دانستنیهای پژوهش)

     

    2-1- ناباروری

     

    2-1-1- ناباروری اولیه

     

    2-1-2- ناباروری ثانویه

     

    2-2- علل شایع ناباروری در مردان

     

    2-3- تقسیم بندی کلینیکال وژنتیکی مردان نابارور

     

    2-4- اسپرماتوژنز

     

    2-5- میتوکندری انسان

     

    1-5-1- ساختار میتوکندری انسان

     

    2-5-2- عملکرد میتوکندری

     

    2-5-3- زنجیره انتقال الکترون در میتوکندری

     

    2-5-4- ژنتیک میتوکندری و همانند سازی و رونویسی ژنوم آن

     

    2-5-5- اختلالات و جهشهای ژنوم میتوکندری

     

    2-6- نقش عملکردی میتوکندری در تحرک اسپرم

     

    2-6-2 – حذف ها و جهش های نقطه ای  ژنوم میتوکندری وارتباط آن با تحرک اسپرم

     

    فصل سوم (مواد و روشها)

     

    3-1- فهرست وسایل و مواد مورد نیاز

     

    3-1-1- تجهیزات و دستگاهها

     

    3-1-2- مواد مورد استفاده

     

    3-2- جمع آوری و ویژگیهای نمونه های سمن

     

    3-3- آنالیز میکروسکوپی پارامترهای اسپرمی

     

    3-4- استخراج DNA از اسپرم

     

    3-5- تعیین كیفیت و کمیت DNA استخراج شده

     

    3-5-1- روش اسپکتروفتومتری

     

    3-6- طراحی پرایمرهای اختصاصی برایmtDNA

     

    3-7- واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR)

     

    3-7-1- مواد لازم جهت انجام  PCR

     

    3-7-2- برنامه PCR اختصاصی

     

    3-7-3- برنامه Long PCR

     

    3-7-4- روش Primer shift PCR برای تائید قطعات حذف شده

     

    3-8- روش PCR-RFLP جهت تعیین ژنوتیپ جهشهایA3243G  و A73G

     

    3-9- بارگیری نمونه ها روی ژل الكتروفورز آگارز

     

    3-9-1- تهیه محلول  TAE 10X

     

    3-9-2- طرز تهیه ژل آگارز 1%

     

    3-9-3- الکتروفورز ژل آگارز افقی

     

    3-9-4- لودینگ بافر

     

    3-9-5- مارکرهای اندازه DNA

     

    3-10- تعیین توالی DNA DNA sequencing))

     

    3-11- آنالیز آماری داده ها

     

    فصل چهارم(نتايج پژوهش)

     

    4-1- بررسی جمعیت مراجعه کننده گان و انتخاب نمونه ها

     

    4-2- کیفیت و کمیت DNA استخراج شده از اسپرم

     

    4-3- اختصاصی ژنوم میتوکندریایی  PCRآنالیز

     

    4-3-1- تایید حضورmtDNA  در ژنوم استخراج شده

     

    4-3-2- مطالعه حذف های بزرگ در mtDNA

     

    4-3-3-تائید قطعات حذفی با استفاده از  Primer Shift PCR

     

    4-3-4- توزیع فراوانی حذف های ژنوم میتوکندری در افراد بارور و نابارور

     

    4-3-5- آنالیز جهش های A73G و A3243G در افراد بارور و نابارور

     

    4-3-6- تعیین توالی DNA

     

    فصل پنجم( بحث ونتیجه گیری)

     

    بحث

     

    پيوست ها

     

    پيوست 1-: نمونه فرم پرشسنامه مر بوط به مراجعه کنندگان

     

    منابع

     

     

    چکيده فارسی:

    بیان مساله: ناباروری به عدم توانایی بچه دار شدن بعد از حداقل یک سال ازدواج بدون استفاده از وسایل پیشگیری اطلاق می شود. حدود نیمی از عوامل ناباروری مربوط به فاکتورهای مردانه می شود. عوامل ژنتیکی، از جمله فاکتورهای مهم دخیل در ناباروری مردان می باشد. فاکتورهای ژنتیکی موثر در ناباروری مردان می تواند داخل هسته ای یا خارج هسته ای باشند. تعداد زیادی از ژن های هسته ای مثل ژن های MTHFR، پروتامین، رسپتور آریل هیدرو کربن و .... در ناباروری مردان دخیل می باشند. حذف ها و موتاسیون های موجود در ژنوم میتوکندری یکی از مهمترین فاکتورهای خارج هسته ای موثر در ناباروری مردان می باشند. هدف از این مطالعه بررسی ارتباط سه حذف bp4977، bp7345 و bp7599 و دو موتاسیون نقطه ای A73G و A3243G با ناباروری در مردان می باشد.

    مواد و روش ها: در یک مطالعه مورد-شاهدی از 60 مرد بارور و 60 مرد نابارور آستنواسپرم مراجعه کننده به مرکز ناباروری بیمارستان شهید بهشتی کاشان نمونه های سمن جمع آوری شد. در مرحله بعد ژنوم اسپرم توسط کیت استخراج ژنوم ایزوله شد. ژنوم میتوکندری برای هر نمونه درناحیه حذف ها، توسط Long PCR تکثیر شد. تایید حذف های مذکور بوسیله روش Primer shift PCR، تایید شد. همچنین ژنوتیپ نمونه ها در نواحی A73G و A3243G بوسیله تکنیک PCR-RFLP تعیین شد و توسط تعیین توالی DNA، تایید شد.

    نتایج: داده های ما نشان داد که  درصد حذف های 4977 (p= 0.029) و 7599 (p= 0.001) در گروه مردان نابارور بطور معناداری بالاتر از گروه مردان بارور بود. درحالی که جهش های نقطه ای موجود در ژنوم میتوکندری ارتباطی با ناباروری مردان نداشت.

     

    نتیجه گیری: یافته های ما نشان می دهد که حذف های 4977bp و 7599bp ریسک فاکتور مهمی برای ناباروری مردان بخصوص آستنواسپرمی محسوب می شود.

     شناسایی حذف ها و جهش های ژنوم میتوکندری برای فهم بهتر ارتباط ناباروری مردان  با اختلالات ژنتیکی دخیل در آن از اهمیت بالایی برخوردار است.

     

    کلمات کلیدی: ناباروری مردان، ژنوم میتوکندری، حذف های  بزرگ میتوکندری، جهش های نقطه ای، PCR-RFLP، Long PCR

     

     

     

     




    برچسب ها: بررسی ارتباط حذف ها و جهش های نقطه ای ژنوم میتوکندری با اختلالات اسپرمی مردان نابارور اختلالات اسپرمی ناباروری مردان ژنوم میتوکندری حذف های بزرگ میتوکندری جهش های نقطه ای PCR RFLP Long PCR
  

به ما اعتماد کنید

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.
این سایت در ستاد ساماندهی پایگاههای اینترنتی ثبت شده است.

درباره ما

تمام حقوق اين سايت محفوظ است. کپي برداري پيگرد قانوني دارد.